電解質(zhì)的測定想來大家很不陌生,對于其測定方法臨床上常用的是離子選擇電極法。ISE法是利用電極電位和離子活度的關(guān)系來測定離子活度的一種電化學(xué)技術(shù),其核心是采用對被測離子選擇性響應(yīng)的敏感膜
ISE分析系統(tǒng)的校準(zhǔn)是使用含有Na+、K+的校準(zhǔn)液來測定出測定電極與參比電極表面電位變化的差值,作為計算因素貯存在微處理器記憶中,用作未知濃度樣本的計算。因校準(zhǔn)曲線不通過零點,所以采用兩點校準(zhǔn)。
ISE法分為直接法、間接法和多層膜千片法
(1)直接法: 血清等標(biāo)本不需要任何稀釋,直接進(jìn)入儀器與電極接觸測量離子活度。優(yōu)點是可采用全血測定,它迅速方便,結(jié)果準(zhǔn)確,不會因樣本中水體積所占比例改變而影響結(jié)果
(2)間接法: 指樣本與一定離子強度緩沖液稀釋后,與電極接觸進(jìn)行檢測。與直接法相比,間接法樣品用量少,由于樣品預(yù)先進(jìn)行稀釋,不易堵塞管道;降低了血脂、不溶性蛋白質(zhì)對電極的污染,以及對電極的損耗,使壽命延長
遇到這種脂血標(biāo)本應(yīng)離心后吸取上層血清,再一萬以上高速離心可去除乳糜層,用下層清澈血清試驗。但是筆者條件有限,沒有高速離心機怎么辦?
生化儀的電解質(zhì)是間接法,脂血可以出結(jié)果,但會受到“電解質(zhì)排斥效應(yīng)”的影響,會有較大誤差。我科現(xiàn)在用電解質(zhì)分析儀 (直接法),標(biāo)本一直吸,可能是由于脂質(zhì)顆粒占據(jù)了血清很大的一部分,使得進(jìn)入電解質(zhì)儀測定流路的血清量不夠,電阻增大的原因
筆者開始用蒸餾水稀釋,問題是稀釋倍數(shù)低了會一直吸,稀釋倍數(shù)高了容易低于檢測范圍于是想到用已知電解質(zhì)濃度的標(biāo)本來稀釋嚴(yán)重脂標(biāo)本,得到檢測結(jié)果后計算出待測標(biāo)本的電解質(zhì)濃度
在生化檢驗中,電解質(zhì)分析多采用電解質(zhì)分析儀來測量人體體液中鉀、鈉、氯等離子的濃度,進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量規(guī)范是獲得正確結(jié)果的前提。
分析前的質(zhì)控:
(1)標(biāo)本的采集與處理: 確保采血器材干爆清潔,選擇正確的的采血時間跟部位,采血中應(yīng)該避免溶血,采集后應(yīng)立即送檢。
(2)抗凝劑與藥物的影響: 血樣不能使用EDTA、檸檬酸鹽等抗凝劑,這些抗凝劑能與Ca+形成絡(luò)合物。
(3)儀器安裝: 安裝在干凈、平穩(wěn)的工作臺上,盡可能避免潮濕和陽光直射
分析中的質(zhì)控
(1)定標(biāo)液: 定標(biāo)液濃度的準(zhǔn)確性,直接影響到樣品測量結(jié)果的準(zhǔn)確度
(2) 電極保養(yǎng):各電極敏感膜的選擇性響應(yīng)特性和穩(wěn)定性直接影響到電解質(zhì)的測量結(jié)果所以電極受用一段時間后就需要保養(yǎng)。
(3)評價分析性能:電解質(zhì)分析儀器、試劑、方法等整個檢測系統(tǒng)一旦確定之后,首先必須對整個系統(tǒng)的不精密度、不準(zhǔn)確度、病人結(jié)果的可報告范圍、分析靈敏度、分析干擾和參考氛圍等分析性能進(jìn)行評價,病建立嚴(yán)格的質(zhì)景控制規(guī)范
(4)質(zhì)控品: 選用質(zhì)量好、性能穩(wěn)定和對ISE響應(yīng)沒有干擾的質(zhì)控血清作為實驗室內(nèi)的質(zhì)控品。
分析后的質(zhì)控:
結(jié)果審核主要是對異常結(jié)果的分析,如葡萄糖、碳酸氫根過低,同時伴有鉀離子過高,往往是血樣未及時分離而放置時間過長所致: 多項檢測結(jié)果過低,往往提示樣品稀釋比例不對,樣品中有纖維蛋白凝塊、或吸樣針部分堵寒導(dǎo)致吸樣量不足所致。
對上述異常測量結(jié)果,要認(rèn)真分析復(fù)查,必要時與臨床取得聯(lián)系,重新采血檢驗。
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